專題3 植物的組織培養(yǎng)技術(shù)
【高考目標(biāo)定位】
植物的組織培養(yǎng)
【考綱知識梳理】
一、植物組織培養(yǎng)的原理與基本過程
1、原理：細(xì)胞全能性。
2、基本過程：外植體 愈傷組織 胚狀體 新植物體
二、影響植物組織培養(yǎng)的因素
1、外植體的選取：生長旺盛的嫩枝生理狀況好，容易誘導(dǎo)脫分化和再分化。
2、培養(yǎng)基：
（1）配制：要嚴(yán)格的進(jìn)行滅菌；
（2）營養(yǎng)：礦質(zhì)元素和有機(jī)物；
（3）調(diào)節(jié)劑：生長素、細(xì)胞分裂素及其比例。
3、環(huán)境條件：溫度、PH、光照等。
三、植物激素在組織培養(yǎng)過程中的重要作用
生長素和細(xì)胞分裂素是啟動細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵性激素，其作用及特點為：
激素使用實驗結(jié)果
使用順序先生長素后細(xì)胞分裂素有利于細(xì)胞分裂
先細(xì)胞分裂素后生長素細(xì)胞即分裂也分化
生長素與細(xì)胞分裂素同時使用分化頻率較高
生長素用量與細(xì)胞分裂素用量的比例該比值高時利于根的分化，抑制芽的形成
該比值低時利于芽的分化，抑制根的形成
該比值適中時促進(jìn)愈傷組織的生長
【要點名師精解】
植物組織培養(yǎng)過程
1、菊花組織培養(yǎng)過程
2、月季花的花藥培養(yǎng)
3、植物組織培養(yǎng)技術(shù)與花藥培養(yǎng)技術(shù)有何區(qū)別？
相同之處：培養(yǎng)基的配制方法、無菌技術(shù)及接種操作等基本相同。
不同之處：花藥培養(yǎng)的選材非常重要，需事先摸索時期適宜的花蕾；花藥裂開后釋放出的愈傷組織或胚狀體也要及時更換培養(yǎng)基；花北培養(yǎng)對培養(yǎng)基配方的要求更為嚴(yán)格。這些都使花藥的培養(yǎng)難度加大。
【例1】下面為植物組織培養(yǎng)過程流程圖解，以下相關(guān)敘述中不正確的是
A. 上述過程中脫分化發(fā)生在b步驟，形成愈傷組織，此過程中植物發(fā)激素?fù)]了重要作用
B. 再分化發(fā)生在d步驟，是愈傷組織重新分化成根或芽等器官的過程
C. 從葉組織塊到種苗形成的過程說明番茄葉片細(xì)胞具有全能性
D. 人工種子可以解決有些作物品種繁殖能力差、結(jié)子困難或發(fā)芽率低等問題
【解析】本題考查植物的組織培養(yǎng)技術(shù)。植物組織培養(yǎng)的原理是植物細(xì)胞具有全能性。其過程為：外植體經(jīng)脫分化形成愈傷組織然后經(jīng)再分化形成胚狀體進(jìn)而培養(yǎng)發(fā)育成新植株。植物激素在啟動細(xì)胞分裂、脫分化和再分化中發(fā)揮重要作用。通過植物組織培養(yǎng)可以實現(xiàn)快速繁殖。人工種子是將得到的胚狀體、不定芽、頂芽、腋芽等材料，經(jīng)過人工薄膜包裝得到的種子，因此繁殖能力強，發(fā)芽率較高。
【答案】B
【例2】用高度分化的植物細(xì)胞、組織或器官進(jìn)行組織培養(yǎng)可以形成愈傷組織，下列敘述錯誤的是( )
A．該愈傷組織是細(xì)胞經(jīng)過脫分化和分裂形成的
B．該愈傷組織的細(xì)胞沒有全能性
C．該愈傷組織是由排列疏松的薄壁細(xì)胞組成的
D．該愈傷組織可以形成具有生根發(fā)芽能力的胚狀結(jié)構(gòu)
【解析】植物組織培養(yǎng)過程：離體的植物細(xì)胞、組織或器官→愈傷組織→根、芽→植物體。離體的植物細(xì)胞、組織或器官分裂形成愈傷組織，這一過程叫脫分化，脫分化離不開細(xì)胞分裂。愈傷組織的細(xì)胞排列疏松而無規(guī)則，是一種高度液泡化的無定形狀態(tài)的薄壁細(xì)胞。愈傷組織經(jīng)過再分化形成具有生根發(fā)芽能力的胚狀結(jié)構(gòu)，最后可培養(yǎng)成完整的植物體，這反映了愈傷組織的細(xì)胞具有全能性。從離體的植物細(xì)胞、組織或器官形成愈傷組織，雖然新個體還沒有長出來，但是全能性依然存在。
【答案】B
【感悟高考真題】
（2010?新課標(biāo)高考）38．[生物??選修模塊3：現(xiàn)代生物科技專題](15分)
請回答：
（1）植物微型繁殖技術(shù)屬于植物組織培養(yǎng)的范疇。該技術(shù)可以保持品種的 ，繁殖種苗的速度 。離體的葉肉細(xì)胞在適宜的條件下培養(yǎng)，最終能夠形成完整的植株，說明該葉肉細(xì)胞具有該植物的全部 。
(2)把試管苗轉(zhuǎn)接到新的培養(yǎng)基上時，需要在超凈工作臺上進(jìn)行，其原因是避免 的污染。
（3）微型繁殖過程中，適宜濃度的生長素單獨使用可誘導(dǎo)試管苗 ，而與 配比適宜時可促進(jìn)芽的增殖。若要抑制試管苗的生長，促使愈傷組織產(chǎn)生和生長，需尊使用的生長調(diào)節(jié)劑是 (脫落酸、2，4-D)。
（4）將某植物試管苗培養(yǎng)在含不同濃度蔗糖的培養(yǎng)基上一段時間后，單株鮮重和光合作用強度的變化如圖。據(jù)圖分析，隨著培養(yǎng)基中蔗糖濃度的增加，光合作用強度的變化趨勢是 ，單株鮮重的變化趨勢是 。據(jù)圖判斷，培養(yǎng)基中不含蔗糖時，試管苗光合作用產(chǎn)生的有機(jī)物的量 (能、不能)滿足自身最佳生長的需要。
(5)據(jù)圖推測，若要在誘導(dǎo)試管苗生根的過程中提高其光合作用能力，應(yīng) (降低，增加)培養(yǎng)基中蔗糖濃度，以便提高試管苗的自養(yǎng)能力。
【解析】植物組織培養(yǎng)技術(shù)是利用植物細(xì)胞全能性的原理進(jìn)行的，是植物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)。在操作過程應(yīng)注意無菌操作，避免雜菌污染，因為培養(yǎng)過程中使用的培養(yǎng)基營養(yǎng)物質(zhì)豐富，適宜濃度的生長素可以誘導(dǎo)試管苗生根，而如果要促進(jìn)愈傷組織形成芽，則需要與細(xì)胞分裂素配比，促進(jìn)愈傷組織產(chǎn)生和生長，應(yīng)使用2,4-D。
【評析】本題考查了組織培養(yǎng)的技術(shù)。需要學(xué)生對選修的內(nèi)容有一定的了解和和熟悉。
【答案】⑴遺傳性、快、遺傳信息 ；（2）微生物；（3）下生根、細(xì)胞分裂素、2,4-D；（4）逐漸減小 先增加后下降、不能；（5）降低
（2010?重慶高考）24．明黨參是我國珍稀藥用植物，對其進(jìn)行保護(hù)性開發(fā)利用的方法有
A．設(shè)計細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器，實現(xiàn)藥用成分的工廠化生產(chǎn)
B．大量培養(yǎng)愈傷組織，直接提取藥用成分
C．大規(guī)模栽培組織培養(yǎng)苗，獲取藥用成分
D利用組織培養(yǎng)獲得胚狀體，制成人工種子
【解析】本題考查了植物組織培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用。對明黨參進(jìn)行保護(hù)性開發(fā)可采用設(shè)計細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器的方法，也可通過大量培養(yǎng)愈傷組織，直接提取，還可通過大量培育培養(yǎng)苗而獲取藥用成份，還可獲取人工種子進(jìn)行大面積種植，正確選項為ABCD。
【答案】ABCD
（2010?江蘇高考）19根據(jù)下列相關(guān)實驗操作．預(yù)期結(jié)果合理的是
A．實驗① 8．實驗② C．實驗③ D．實驗④
【解析】本題考查了考生對教材實驗的理解能力和分析能力。實驗（1）中結(jié)果應(yīng)是0.3%溶液中質(zhì)壁分離明顯，實驗（2）中毛霉應(yīng)在20℃環(huán)境中生長最好，實驗（4）中，如果此時2，4-D濃度低于最適濃度，則濃度再低的話促進(jìn)生根效果則較差了，所以預(yù)期最合理的應(yīng)是實驗（3）即C項正確。
【答案】C
（2009?山東高考）34.（8分）（生物一生物技術(shù)實）
人參是一種名貴中藥材，其有效成分主要是人參皂苷。利用細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)人參皂苷的大致流程如下：
請回答：
（1）配制誘導(dǎo)愈傷組織的固體培養(yǎng)基，分裝后要進(jìn)行 。
接種前，要對人參根進(jìn)行 。
（2）用于離體培養(yǎng)的根切塊，叫做 。培養(yǎng)幾天后發(fā)現(xiàn)少數(shù)培養(yǎng)基被污染，若是有顏色的絨毛狀菌落，屬于 污染；若是有光澤的黏液狀菌落，屬于 污染。
（3）用少量 酶處理愈傷組織，獲取單細(xì)胞或小細(xì)胞團(tuán)，在液體培養(yǎng)基中進(jìn)行懸浮培養(yǎng)，可有效提高人參皂苷合成量。
（4）人參皂苷易溶于水溶性（親水性）有機(jī)溶液，從培養(yǎng)物干粉中提取人參皂苷宜選用
方法，操作時應(yīng)采用 加熱。
【解析】山東理綜生物試題選修一試題歷年來，立足課本，主要考察課本的基礎(chǔ)知識，題目較簡單。今年仍然立足課本，以植物組織培養(yǎng)為材料背景考察了植物組織培養(yǎng)過程中涉及到的培養(yǎng)基及消毒滅菌的相關(guān)的知識，及污染后的菌落特征的比較。同時考查了選修一中關(guān)于物質(zhì)的提取和鑒定的專題，跨度較大，考查的知識面較廣。
（1）接種前，要對材料進(jìn)行消毒（不能填滅菌，滅菌時是采用強烈的因素殺菌），配制培養(yǎng)基并分裝后要用滅菌鍋滅菌。
（2）比較菌落特征：真菌污染：有顏色的絨毛狀菌落
細(xì)菌污染：有光澤的黏液狀菌落
（3）利用果膠酶處理愈傷組織可以獲得單個的細(xì)胞
（4由題干，人參皂苷易溶于親水性有機(jī)溶液，故而采用萃取的方法可以從培養(yǎng)物干粉中提取人參皂苷宜。
【答案】（1）滅菌 消毒
（2）外植體 真菌（霉菌） 細(xì)菌
（3）果膠
（4）萃取 水浴
（2009?上海高考）36.（8分）回答下列有關(guān)植物組織培養(yǎng)的問題。
（1）用于植物組織培養(yǎng)的植物材料稱為________。
（2）組織培養(yǎng)中的細(xì)胞，從分化狀態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)槲捶只癄顟B(tài)的過程稱為________。
（3）在再分化階段所用的培養(yǎng)基中，含有植物激素X和植物激素Y，逐漸改變培養(yǎng)基中這兩種植物激素的濃度比，未分化細(xì)胞群的變化情況如下圖所示，據(jù)圖指出兩種激素的不同濃度比與形成芽、根、愈傷組織的關(guān)系：
1）當(dāng)植物激素X與植物激素Y的濃度比等于1時，______________________________；
2）________________________________________________________；
3）________________________________________________________；
（4）若植物激素Y是生長素，在植物組織培養(yǎng)中其主要作用是________；則植物激素X的名稱是________________。
（5）生產(chǎn)上用試管苗保留植物的優(yōu)良性狀，其原因是________________________________。
【解析】本題主要考查植物組織培養(yǎng)相關(guān)知識。
（1）植物組織培養(yǎng)的材料叫外植體；
（2）植物組織培養(yǎng)的核心過程是脫分化與再分化，脫分化指由分化狀態(tài)變?yōu)槲捶只癄顟B(tài)，再分化指由未分化狀態(tài)變?yōu)榉只癄顟B(tài)；
（3）仔細(xì)分析所給示意圖，可知植物激素X與植物激素Y濃度比為1時，利于愈傷組織的形成，大于1時利于細(xì)胞群分化出芽，小于1時利于細(xì)胞群分化出根；
（4）生長素在植物組織培養(yǎng)中主要作用是促進(jìn)細(xì)胞生長、分裂和分化，植物組織培養(yǎng)過程中除需要生長素外還必需細(xì)胞分裂素，二者共同起作用；
（5）植物組織培養(yǎng)是一種無性繁殖技術(shù)，利于保持親本的優(yōu)良性狀。
【答案】（1）外植體
（2）去分化（脫分化）
（3）1）未分化細(xì)胞群經(jīng)分裂形成愈傷組織；
2）當(dāng)植物激素X與植物激素Y的濃度比大于1時，未分化細(xì)胞群分化形成芽；
3）當(dāng)植物激素X與植物激素Y的濃度比小于1時，未分化細(xì)胞群分化形成根。
（4）促進(jìn)細(xì)胞的生長（伸長）、分裂和分化 細(xì)胞分裂素
（5）組織培養(yǎng)形成試管苗的過程屬于無性生殖，后代不發(fā)生性狀分離。
（2008?江蘇高考）下列關(guān)于植物組織培養(yǎng)的敘述中，錯誤的是
A．培養(yǎng)基中添加蔗糖的目的是提供營養(yǎng)和調(diào)節(jié)滲透壓
B．培養(yǎng)基中的生長素和細(xì)胞分裂素影響愈傷組織的生長和分化
C．離體器官或組織的細(xì)胞都必須通過脫分化才能形成愈傷組織
D．同一株綠色開花植物不同部分的細(xì)胞經(jīng)培養(yǎng)獲得的愈傷組織基因相同
【解析】同一株綠色開花植物的細(xì)胞分體細(xì)胞和生殖細(xì)胞兩類，自然這兩類細(xì)胞經(jīng)培養(yǎng)獲得的愈傷組織細(xì)胞的遺傳物質(zhì)（基因）亦不相同。
【答案】D
（2008?江蘇高考）某組織培養(yǎng)實驗室的愈傷組織被真菌嚴(yán)重污染，為查找污染原因設(shè)計了4個實驗，實驗條件除圖示外共他均相同。下列各圖表示實驗結(jié)果，據(jù)圖可得出的初步結(jié)論是
A．污染主要不是培養(yǎng)基滅菌時間短造成的
B．污染主要來源于組織培養(yǎng)所用的離體組織
C．調(diào)節(jié)培養(yǎng)基pH不能解決污染問題
D．調(diào)節(jié)培養(yǎng)溫度不能解決污染問題
【解析】讀圖可以看出，ACD圖解所示的信息說明污染源不是這三方面的原因；B中的曲線變化明顯，是污染的主要因素。
【點評】本題主要考查解讀表格圖的能力。
【答案】ABCD。
【考點精題精練】
1.甘薯種植多年后易積累病毒而導(dǎo)致品種退化。目前生產(chǎn)上采用莖尖分生組織離體培養(yǎng)的方法快速繁殖脫毒的種苗，以保證該品種的品質(zhì)和產(chǎn)量水平。這種通過分生組織離體培養(yǎng)獲得種苗的過程不涉及細(xì)胞的( C )
A．有絲分裂 B．分化
C．減數(shù)分裂 D．全能性
2.要將胡蘿卜韌皮部細(xì)胞培養(yǎng)成完整植株，需要( ABD )
A．具有完整的細(xì)胞核的細(xì)胞
B．離體狀態(tài)
C．導(dǎo)入外源基因
D．一定的營養(yǎng)物質(zhì)和激素
3.植物細(xì)胞表現(xiàn)出全能性的必要條件是（ C ）
A.給與適宜的營養(yǎng)和外界條件。
B.導(dǎo)入其他植物細(xì)胞的基因。
C.脫離母體后，給與適宜的營養(yǎng)和外界條件。
D.將成熟篩管的細(xì)胞核移植到去核的卵細(xì)胞內(nèi)。
4.利用植物的莖、葉片等，在無菌條件下，培養(yǎng)在玻璃器皿中人工配制的培養(yǎng)基上，使它發(fā)育成完整的植株。這種技術(shù)可以用來培育植物新品種，也可以在較短時間內(nèi)大量繁殖植物，還可以防止植物病毒的危害。下列關(guān)于這種技術(shù)的敘述，正確的是( D )
①這種技術(shù)利用了植物細(xì)胞的全能性 ②這種技術(shù)叫做組織培養(yǎng)，可以克隆生物體 ③這種技術(shù)是一種無性繁殖的方式 ④這種技術(shù)屬于細(xì)胞工程的應(yīng)用領(lǐng)域之一
A．① B．①②③
C．①② D．①②③④
5.（2010?北京東城區(qū)高三一模）下圖為將胡蘿卜的離體組織在一定條件下培育形成試管苗的過程示意圖。有關(guān)敘述正確的是A
A．利用此過程獲得的試管苗可能為雜合子
B：①②過程中都會發(fā)生細(xì)胞的增殖和分化
C．多倍體植株的培育需經(jīng)過如圖所示過程
D．此過程依據(jù)的生物學(xué)原理是細(xì)胞膜具有流動性
6.下面為番茄植物組織培養(yǎng)過程的流程圖解，以下相關(guān)敘述不正確的是 B
A．脫分化發(fā)生在b步驟，形成愈傷組織，在此過程中植物激素發(fā)揮了重要作用
B．再分化發(fā)生在d步驟，是愈傷組織重新分化成根或芽等器官的過程
C．從葉組織塊到種苗形成的過程說明番茄葉片細(xì)胞具有全能性
D．人工種子可以解決有些作物品種繁殖能力差、結(jié)子困難或發(fā)芽率低等問題
7.在離體的植物器官、組織或細(xì)胞脫分化形成愈傷組織的過程中，下列哪一項條件是不需要的 C
A.消毒滅菌B.適宜的溫度
C.充足的光照 D.適宜的養(yǎng)料和激素
8.MS培養(yǎng)基和培養(yǎng)微生物所配制的培養(yǎng)基的主要區(qū)別為( A )
A．MS培養(yǎng)基一般含植物激素，微生物培養(yǎng)基不含植物激素
B．MS培養(yǎng)基不需要氨基酸，微生物培養(yǎng)基含各種氨基酸
C．MS培養(yǎng)基不需碳源，微生物培養(yǎng)基含碳源
D．MS培養(yǎng)基含維生素B1和維生素B6，微生物培養(yǎng)基不含有
9.下列關(guān)于植物組織培養(yǎng)中滅菌操作的敘述，錯誤的是( B )
A．外植體可以用酒精滅菌
B．鑷子等器械需酒精滅菌
C．操作前手需酒精消毒
D．培養(yǎng)基需高壓蒸汽滅菌
10.植物組織培養(yǎng)所需營養(yǎng)的敘述，不正確的是( )
A．MS培養(yǎng)基既含硝態(tài)氮又含銨態(tài)氮
B．維生素以輔酶的形式參與生物催化劑酶系活動
C．植物生長調(diào)節(jié)物質(zhì)包括生長素、細(xì)胞分裂素及赤霉素等
D．植物組織培養(yǎng)過程中無需從外部供糖
11.下列關(guān)于消毒效果的論述，不正確的是( ABC )
A．70％酒精對外植體消毒效果好，但用時長，去除易
B．O．1％氯化汞對外植體消毒效果最好，用時較短，去除也易
C．10％過氧化氫對外植體消毒效果最好，但易揮發(fā)、用時長，去除最易
D．抗菌素對外植體消毒效果較好，消毒時間較長，去除難易程度適中
12.下列關(guān)于花藥培養(yǎng)過程中注意事項的敘述，正確的是( D )
A．花藥培養(yǎng)成功與否與材料選擇無關(guān)
B．花藥培養(yǎng)成幼苗后，一定不能分瓶培養(yǎng)
C．花藥培養(yǎng)成愈傷組織的過程中，除了適宜的溫度、pH等，還要注意照光
D．一般地講，材料選在單核期時花藥培養(yǎng)成功率較高
13.接種和培養(yǎng)花藥時應(yīng)注意的事項全對的一組是（ A ）
①不損傷花藥 ②徹底去除花絲 ③ 幼小植株形成后需要光照 ④花藥開裂釋放出的幼小植株會分別發(fā)育成單倍體植株
A. ①②③ B. ①②④ C. ②③④ D. ①③④
14.在植物組織培養(yǎng)過程中，生長素和細(xì)胞分裂素的使用會影響實驗結(jié)果。下列說法不正確的是（ D ）
A.兩種激素用量的比例影響實驗結(jié)果 。
B.兩種激素使用的先后順序影響實驗結(jié)果。
C.兩種激素使用時的濃度影響實驗結(jié)果。
D.以上說法都不正確。
15.（2010?北京順義區(qū)高三一模）下列各項培育植物新品種的過程中，不經(jīng)過愈傷組織階段的是B
A．通過植物體細(xì)胞雜交培育白菜??甘藍(lán)雜種植株 B
B．通過多倍體育種培育無子西瓜
C．通過單倍體育種培育優(yōu)質(zhì)小麥
D．通過基因工程培育
16.（2010?北京西城區(qū)高三一模）紫杉醇是從紅豆杉屬植物中提取的最有效的抗癌制劑之。目前，生產(chǎn)紫杉醇的主要原料是天然生長的紅豆杉樹皮，而大量剝?nèi)淦斐蓸淠镜乃劳龊唾Y源的破壞。請回答下列問題。
（1）為了合理開發(fā)和利用紅豆杉，保護(hù)野生植物資源，科研人員取生長狀況相似的野生南方紅豆杉和人工栽培的南方紅豆杉，分別測量其不同部位完全烘干的樣品中紫杉醇的含量（占干重的百分比），測定結(jié)果見表1。
表1 南方紅豆杉樹木各部位紫杉醇含量（％，w/w）
從實驗結(jié)果看，紅豆杉中紫杉醇含量最高的部位是________，不同部位紫杉醇含量不同的根本原因是_________。為保護(hù)紅豆杉資源，應(yīng)以其________為原料，提取、分離紫杉醇。
（2）科研人員為尋找更多紫杉醇來源，嘗試?yán)弥参锝M織培養(yǎng)技術(shù)，從紅豆杉的愈傷組織中提取紫杉醇。實驗結(jié)果如表2所示。
表2 不同外植體形成的愈傷組織中紫杉醇含量（％，w/w）
①該實驗的目的是研究________________________________________。
②上述實驗結(jié)果說明________最適合做外植體，經(jīng)過________過程形成愈傷組織。
（3）2，4-D作為植物生長調(diào)節(jié)劑，在生產(chǎn)實踐中還可以應(yīng)用在________等方面（寫出兩點即可）。
答案：（1）樹皮 基因的選擇性表達(dá) 樹葉（枝條、種子）
（2）①研究植物不同部位做外植體所形成的愈傷組織中紫杉醇的含量
研究不同生長調(diào)節(jié)劑的組合與水平對愈傷組織中紫杉醇含量的影響
②樹葉 脫分化
（3）除草劑，促進(jìn)生長、促進(jìn)扦插生根，培育無子果實或促進(jìn)果實發(fā)育等（寫出兩點即可）。
17.（2010?山東省臨沂市高三一模）如圖為通過花藥培養(yǎng)月季花粉植株的一種途徑。請回答下列相關(guān)問題。
（1）選擇花藥時，一般要通過 來確定其中的花粉是否處于適宜的發(fā)育期，一般來說，在 期，細(xì)胞核由中央移向細(xì)胞一側(cè)的時期，通常選擇 的花蕾，花藥培養(yǎng)成功率最高。
（2）上述途徑是通過胚狀體階段發(fā)育成植株，還可以將花粉在誘導(dǎo)培養(yǎng)基上先形成 ，再將其誘
導(dǎo)分化成植株。
（3）某同學(xué)在培養(yǎng)過程中發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上感染了幾種細(xì)菌。若在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入
指示劑培養(yǎng)幾種菌后，指示劑變紅就可以鑒定其中含有能夠分解尿素的菌；若在以纖維素為唯
一碳源的培養(yǎng)基中加入 染料，培養(yǎng)幾種菌后，培養(yǎng)基中出現(xiàn)現(xiàn)透明圈，就可以鑒定其中含有纖
維素分解菌。在培養(yǎng)過程中為了檢驗制備的培養(yǎng)基是否合各，采取措施是 ，觀察結(jié)
果，如果 ，說明培養(yǎng)基制備成功，否則需要重新制備。
（4）若欲獲取大量抗性基因?qū)胗鷤M織細(xì)胞，可以采用PCR技術(shù)。PCR利用了
原理，通過控制溫度來控制DNA雙鏈的解聚與結(jié)合。為了避免外源DNA等因素的污染，PCR實驗
中使用的微量離心管等在使用前必須進(jìn)行 。
答案：（每空1分，共10分）
（1）鏡檢 單核期 完全未開放
（2）愈傷組織
（3）酚紅 剛果紅 將接種后的培養(yǎng)基和一個未接種的培養(yǎng)基則時在適宜條件下培養(yǎng)未接種的培養(yǎng)基無菌落生長
（4）DNA的熱變性（DNA的變性和復(fù)性） 高壓滅菌
18.（2010?上海市奉賢區(qū)高三二模）如下圖所示，為植株繁殖示意圖，請據(jù)圖回答：
（1）上世紀(jì)50年代，斯蒂瓦特利用胡蘿卜根切片培育胡蘿卜，首次證實了細(xì)胞的 ，是植物組織培養(yǎng)的理論基礎(chǔ)。該過程需在 條件下進(jìn)行，并需控制溫度、PH值和光照條件。
（2）若培養(yǎng)過程中，為誘導(dǎo)愈傷組織形成根時，培養(yǎng)基中植物激素的特點是
。
（3）假設(shè)A試管內(nèi)是基因型為AaBB的某植物的花粉，則培育出的B植株稱為 植株，可能的基因型為 。由于這些植株高度不育，所以必須用 處理才能獲得理想的植株。
（4）若在離體細(xì)胞內(nèi)導(dǎo)入含有抗蟲基因的重組質(zhì)粒，則培養(yǎng)出的植物具有抗蟲性，該項科技成果在環(huán)境保護(hù)上的重要作用是______ ____。質(zhì)粒和抗蟲基因的重組需要 酶，同時所用的質(zhì)粒最好含有 基因，便于檢測。
答案：（9分）
（1）全能性 無菌（2）細(xì)胞分裂素與生長素的比值小于1（3）單倍體 AB、aB 秋水仙素
（4）減輕農(nóng)藥對環(huán)境的污染 限制酶和DNA連接酶 遺傳標(biāo)記
19.（2010?江蘇省南通、揚州、泰州三市高三二模）在植物組織培養(yǎng)過程中，愈傷組織的成功誘導(dǎo)是至關(guān)重要的步驟。科學(xué)家以食用稗的成熟胚作為外植體，在基本培養(yǎng)基上研究植物生長調(diào)節(jié)劑對食用稗愈傷組織誘導(dǎo)的影響。實驗結(jié)果如下表。請回答相關(guān)問題：
注：愈傷組織誘導(dǎo)率（%）＝產(chǎn)生愈傷組織的外植體數(shù)/接種外植體總數(shù)×100%
（1）從上表可以知道，在基本培養(yǎng)基中添加較高濃度的 有利于食用稗胚形成愈傷組織，而添加 則不利于食用稗胚愈傷組織的形成。
（3）影響愈傷組織成功誘導(dǎo)的因素除植物生長調(diào)節(jié)劑外，培養(yǎng)的環(huán)境條件也是重要的因素�，F(xiàn)給你提供200個已經(jīng)消毒過的食用稗的成熟胚，在上述研究的基礎(chǔ)上，探究光照對愈傷組織形成的影響。
實驗步驟：
①將200個已經(jīng)消毒過的食用稗的成熟胚平均分為甲、乙兩組，分別接種到 培養(yǎng)基上；
② ；
③ 。
預(yù)期實驗結(jié)果和結(jié)論： 。
答案：（8分）
（1）2，4－D 6－BA
（2）①L3 ②甲組置于光照條件下培養(yǎng)，乙組置于黑暗條件下培養(yǎng)，其它條件相同且適宜；③培養(yǎng)一段時間后，分別計數(shù)甲、乙兩組中形成愈傷組織的個數(shù)并計算愈傷組織誘導(dǎo)率。
預(yù)期實驗結(jié)果和結(jié)論：①如甲組的愈傷組織誘導(dǎo)率大于乙組的愈傷組織誘導(dǎo)率，則光照有利于愈傷組織的形成；②如甲組的愈傷組織誘導(dǎo)率小于乙組的愈傷組織誘導(dǎo)率，則黑暗有利于愈傷組織的形成；③如甲組的愈傷組織誘導(dǎo)率和乙組的愈傷組織誘導(dǎo)率相當(dāng)，則光照、黑暗對愈傷組織的形成沒有影響
20.（2010?北京宣武區(qū)高三一模）植物組織培養(yǎng)是克隆植物的一種方法，過程如下圖所示，回答相應(yīng)的問題：
（1）為了獲得脫毒植株，外植體往往取自植物的花芽、葉芽等處的分生組織，其原因是______________________________。
（2）培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基除添加營養(yǎng)物質(zhì)外，還需要添加植物激素，其目的是誘導(dǎo)外植體__________________________________。
（3）在生產(chǎn)實踐中為獲得大量的細(xì)胞產(chǎn)物如：紫杉醇，可將①__________放入液體培養(yǎng)基中的經(jīng)機(jī)械作用分散成單個細(xì)胞，制備成細(xì)胞浮液，再經(jīng)過_________即可獲得大量細(xì)胞。
（4）組織培養(yǎng)過程需要植物生長和繁殖的最適條件，否則在光學(xué)顯微鏡下可能觀察到發(fā)生_________________異常，進(jìn)而使植物出現(xiàn)遺傳不穩(wěn)定甚至不育。
（5）植物組織培養(yǎng)技術(shù)不僅應(yīng)用于花卉、果樹的快速、大量繁殖以及脫毒植株的獲取，還廣泛用于____________、__________、__________等育種過程中。
答案：（1）這些部位很少受到病毒等病原體的侵害
（2）脫分化和再分化
（3）愈傷組織 細(xì)胞分裂
（4）染色體結(jié)構(gòu)與數(shù)目
（5）植物體細(xì)胞雜交育種 基因工程育種 單倍體育種
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