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2012屆高考生物二輪復習講義：
生物技術(shù)實踐核心知識自查（人教版選修一）
考點一、微生物的利用
(一)微生物的培養(yǎng)與應用
1．微生物的實驗室培養(yǎng)
(1)培養(yǎng)基
①概念：人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)。
②制備：計算→稱量→溶化→滅菌→倒平板。
③分類和應用


(2)無菌技術(shù)
主要是為了防止外雜菌的入侵，重點是消毒和滅菌。二者的區(qū)別如下：
使用方法結(jié)　果常用的方法舉例
消毒較為溫和的物理或化學方法僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對人體有害的微生物(不包括芽孢和孢子)煮沸消毒法、巴氏消毒法、化學藥劑消毒法
滅菌強烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌
(3)微生物的純化培養(yǎng)
方法平板劃線法稀釋涂布平板法
注意事項①接種環(huán)的灼燒a.第一次劃線前：殺死殘留微生物，避免污染菌種和培養(yǎng)基b.每次劃線前：殺死殘留菌種，保證每次劃線菌種自上次劃線末端c.劃線結(jié)束后：殺死殘留菌種，避免污染環(huán)境和感染操作者�、谧茻�接種環(huán)之后，要冷卻后才能伸入菌液，以免溫度太高殺死菌種�、蹌澗�時最后一區(qū)域不要與第一區(qū)域相連�、軇澗�用力要大小適當，防止用力過大將培養(yǎng)基劃破①稀釋操作時：每支試管及其中的9 mL水、移液管等均需滅菌；操作時，試管口和移液管應在離火焰1 cm～2 cm處
②涂布平板時：a.涂布器用70%酒精消毒，取出時，讓多余酒精在燒杯中滴盡，然后將沾有少量酒精的涂布器在酒精燈火焰上引燃b.不要將過熱的涂布器放在盛放酒精的燒杯中，以免引燃其中的酒精c.酒精燈與培養(yǎng)皿距離要合適，移液管管頭不要接觸任何物體
目的在培養(yǎng)基上形成由單個菌種繁殖而的子細胞群體——菌落
培養(yǎng)平板冷凝后倒置培養(yǎng)，使培養(yǎng)基表面的水分更好地揮發(fā)，防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基造成污染
2.微生物的分離與計數(shù)
(1)土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)法。
①篩選菌株：利用選擇培養(yǎng)基篩選菌株。
②測定微生物數(shù)量的常用方法：活菌計數(shù)法和顯微鏡直接計數(shù)法。
③過程：土壤取樣→樣品的稀釋→微生物的培養(yǎng)與觀察。
(2)分解纖維素的微生物的分離
①實驗原理

②流程：土壤取樣→選擇培養(yǎng)→梯度稀釋→涂布平板→挑選菌落。
(二)傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應用
1．果酒、果醋、腐乳、泡菜制作過程中所用菌種及控制條的比較

2.果酒、果醋、腐乳和泡菜制作過程比較及亞硝酸鹽含量的檢測


二、酶的應用
(一)果膠酶在果汁生產(chǎn)中的作用
1．果膠酶的作用：分解細胞壁及胞間層的主要成分——果膠，使其變成可溶性的半乳糖醛酸，易于榨取果汁。
2．酶的活性與影響酶活性的因素
(1)酶的活性是指酶催化一定化學反應的能力。酶反應速度用單位時間內(nèi)、單位體積中反應物的減少量或產(chǎn)物的增加量表示。
(2)影響酶活性的因素有溫度、pH和酶的抑制劑等。
(二)探討加酶洗衣粉的洗滌效果
1．加酶洗衣粉中含有的常用酶制劑：蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶、纖維素酶等。
2．實驗過程要遵循單一變量原則和對照原則，嚴格控制無關(guān)變量，同時還要考慮到酶的專一性和洗滌成本等問題。
(三)酵母細胞的固定化
1．固定化酶和固定化細胞技術(shù)是利用物理或化學方法將酶或細胞固定在一定空間內(nèi)的技術(shù)，包括包埋法、化學結(jié)合法和物理吸附法。
2．配制海藻酸鈉溶液時要用酒精燈加熱，加熱時要用小火間斷加熱，反復幾次，直到海藻酸鈉溶化為止。
3．固定化酶和固定化細胞技術(shù)的比較
類型固定酶的種類適用方法優(yōu)點及不足實例
固定化酶一種化學結(jié)合法、物理吸附法可反復利用，但只催化一種或一類化學反應固定化葡萄糖異構(gòu)酶
固定化細胞一系列包埋法成本低、操作容易，但反應效果下降固定化酵母細胞
三、生物技術(shù)在其他方面的應用
(一)植物有效成分的提取
1．植物芳香油三種提取方法的比較
提取方法實驗原理方法步驟適用范圍
水蒸氣蒸餾法利用水蒸氣將揮發(fā)性較強的植物芳香油攜帶出形成油水混合物，冷卻后，又會重新分出油層和水層①水蒸氣蒸餾
②分離油層
③除水過濾適用于提取玫瑰精油、薄荷油等揮發(fā)性強的芳香油
壓榨法通過機械加壓，壓榨出果皮中的芳香油①石灰水浸泡、漂洗
②壓榨、過濾、靜置
③再次過濾適用于柑橘、檸檬等易焦糊原料中芳香油的提取
有機溶劑萃取使芳香油溶解在有機溶劑中，蒸發(fā)溶劑后就可獲得芳香油①粉碎、干燥②萃取、過濾③濃縮適用范圍廣，要求原料的顆粒要盡可能細小，能充分溶解在有機溶劑中

(2)影響植物組織培養(yǎng)的因素
①內(nèi)因：植物的種類，同一種植物材料的年齡、保存時間的長短、部位等。
②外因：S 培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質(zhì)和 pH、溫度、光照等環(huán)境條。
③植物激素：生長素用量/細胞分裂素用量影響細胞分裂、分化，該比值較高時，有利于根的分化、抑制芽的形成；該比值較低時，有利于芽的分化、抑制根的形成；該比值適中時，促進愈傷組織形成。
2．植物莖的組織培養(yǎng)與花藥植株的產(chǎn)生的比較

3.植物組織培養(yǎng)技術(shù)、微生物培養(yǎng)技術(shù)和無土栽培技術(shù)的比較
植物組織培養(yǎng)微生物培養(yǎng)無土栽培
含義在無菌條下，將離體的植物體器官或組織接種在適當?shù)呐囵B(yǎng)基上進行培養(yǎng)，最終發(fā)育成完整植物體在無菌條下，在適宜的營養(yǎng)和環(huán)境條下對微生物的培養(yǎng)將植物生長發(fā)育過程中所需各種礦質(zhì)元素按一定比例配成營養(yǎng)液，并利用這種營養(yǎng)液栽培植物
培養(yǎng)基成分水、礦質(zhì)元素、蔗糖、維生素、有機添加劑和植物激素等水、無機鹽、
碳、氮等水、必需礦質(zhì)元素
特殊操
作要求嚴格控制無菌操作，在培養(yǎng)過程中要更換培養(yǎng)基，調(diào)節(jié)細胞分裂素和生長素的比例嚴格控制無菌操作，整個培養(yǎng)過程無需更換培養(yǎng)基適宜的環(huán)境條，基質(zhì)墊底并固定幼苗，不需要保證無菌條
三種技術(shù)中均需要一定的營養(yǎng)物質(zhì)，但營養(yǎng)物質(zhì)的劃分標準不同。
(三)DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)
1．多聚酶鏈式反應擴增DN *** 段細胞內(nèi)DNA復制與體外DNA擴增(PCR技術(shù))比較
2.血紅蛋白的提取和分離
(1)實驗原理：依據(jù)蛋白質(zhì)的各種特性可以將不同種類的蛋白質(zhì)分離
(2)常用方法
①凝膠色譜法：根據(jù)相對分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì)。
②電泳：利用待分離樣品中各種分子帶電性質(zhì)的差異及分子本身大小、形狀的不同產(chǎn)生不同的遷移速度，由此將各種分子分離。
(3)蛋白質(zhì)的提取和分離一般分為四步：樣品處理、粗分離、純化和純度鑒定。
3．DNA的粗提取與鑒定
(1)基本原理
①DNA在不同濃度的NaCl溶液中的溶解度不同，在0.14 mol/L的NaCl溶液中的溶解度最低。
②DNA不溶于酒精溶液。
③DNA不被蛋白酶水解。
④DNA可被二苯胺染成藍色。
(2)主要步驟：選取材料→破碎細胞，獲取含DNA的濾液→去除濾液中的雜質(zhì)→DNA的析出與鑒定。
(3)注意事項
①選擇動物細胞時，細胞比較容易破碎；選擇植物細胞時則要先溶解細胞膜(如加洗滌劑、研磨等)。
②以鳥類等動物血中的紅細胞為材料時，需向血液中加入檸檬酸鈉抗凝。
③二苯胺需現(xiàn)用現(xiàn)配。

本文來自：逍遙右腦記憶 http://douzifanli.com/gaosan/46543.html

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