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高中生物實驗：普通光學(xué)顯微鏡的使用方法

(一)顯微鏡的主要構(gòu)造

普通光學(xué)顯微鏡的構(gòu)造主要分為三部分：機械部分、照明部分和光學(xué)部分。

1.機械部分

(1)鏡座：是顯微鏡的底座，用以支持整個鏡體。

(2)鏡柱：是鏡座上面直立的部分，用以連接鏡座和鏡臂。

(3)鏡臂：一端連于鏡柱，一端連于鏡筒，是取放顯微鏡時手握部位。

(4)鏡筒：連在鏡臂的前上方，鏡筒上端裝有目鏡，下端裝有物鏡轉(zhuǎn)換器。

(5)物鏡轉(zhuǎn)換器(旋轉(zhuǎn)器)：接于棱鏡殼的下方，可自由轉(zhuǎn)動，盤上有3-4個圓孔，是安裝物鏡部位，轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器，可以調(diào)換不同倍數(shù)的物鏡，當(dāng)聽到碰叩聲時，方可進行觀察，此時物鏡光軸恰好對準通光孔中心，光路接通。

(6)鏡臺(載物臺)：在鏡筒下方，形狀有方、圓兩種，用以放置玻片標本，中央有一通光孔，我們所用的顯微鏡其鏡臺上裝有玻片標本推進器(推片器)，推進器左側(cè)有彈簧夾，用以夾持玻片標本，鏡臺下有推進器調(diào)節(jié)輪，可使玻片標本作左右、前后方向的移動。

(7)調(diào)節(jié)器：是裝在鏡柱上的大小兩種螺旋，調(diào)節(jié)時使鏡臺作上下方向的移動。

①粗調(diào)節(jié)器(粗螺旋)：大螺旋稱粗調(diào)節(jié)器，移動時可使鏡臺作快速和較大輻度的升降，所以能迅速調(diào)節(jié)物鏡和標本之間的距離使物象呈現(xiàn)于視野中，通常在使用低倍鏡時，先用粗調(diào)節(jié)器迅速找到物象。

②細調(diào)節(jié)器(細螺旋)：小螺旋稱細調(diào)節(jié)器，移動時可使鏡臺緩慢地升降，多在運用高倍鏡時使用，從而得到更清晰的物象，并借以觀察標本的不同層次和不同深度的結(jié)構(gòu)。

2.照明部分

裝在鏡臺下方，包括反光鏡，集光器。

(1)反光鏡：裝在鏡座上面，可向任意方向轉(zhuǎn)動，它有平、凹兩面，其作用是將光源光線反射到聚光器上，再經(jīng)通光孔照明標本，凹面鏡聚光作用強，適于光線較弱的時候使用，平面鏡聚光作用弱，適于光線較強時使用。

(2)集光器(聚光器)位于鏡臺下方的集光器架上，由聚光鏡和光圈組成，其作用是把光線集中到所要觀察的標本上。

①聚光鏡：由一片或數(shù)片透鏡組成，起匯聚光線的作用，加強對標本的照明，并使光線射入物鏡內(nèi)，鏡柱旁有一調(diào)節(jié)螺旋，轉(zhuǎn)動它可升降聚光器，以調(diào)節(jié)視野中光亮度的強弱。

②光圈(虹彩光圈)：在聚光鏡下方，由十幾張金屬薄片組成，其外側(cè)伸出一柄，推動它可調(diào)節(jié)其開孔的大小，以調(diào)節(jié)光量。

3.光學(xué)部分

(1)目鏡：裝在鏡筒的上端，通常備有2-3個，上面刻有5×、10×或15×符號以表示其放大倍數(shù)，一般裝的是10×的目鏡。

(2)物鏡：裝在鏡筒下端的旋轉(zhuǎn)器上，一般有3-4個物鏡，其中最短的刻有“10×”符號的為低倍鏡，較長的刻有“40×”符號的為高倍鏡，最長的刻有“100×”符號的為油鏡，此外，在高倍鏡和油鏡上還常加有一圈不同顏色的線，以示區(qū)別。

在物鏡上，還有鏡口率(N.A.)的標志，它反應(yīng)該鏡頭分辨力的大小，其數(shù)字越大，表示分辨率越高，各物鏡的鏡口率如下表：

物鏡 鏡口率(N.A.) 工作距離(mm)

10× 0.25 5.40

40× 0.65 0.39

100× 1.30 0.11

表中的工作距離是指顯微鏡處于工作狀態(tài)(物象調(diào)節(jié)清楚)時物鏡的下表面與蓋玻片(蓋玻片的厚度一般為0.17mm)上表面之間的距離，物鏡的放大倍數(shù)愈大，它的工作距離愈小。

顯微鏡的放大倍數(shù)是物鏡的放大倍數(shù)與目鏡的放大倍數(shù)的乘積，如物鏡為10×，目鏡為10×，其放大倍數(shù)就為10×10=100。

(二)顯微鏡的使用方法

1.低倍鏡的使用方法

(1)取鏡和放置：顯微鏡平時存放在柜或箱中，用時從柜中取出，右手緊握鏡臂，左一手托住鏡座,將顯微鏡放在自己左肩前方的實驗臺上，鏡座后端距桌邊1-2寸為宜，便于坐著操作。

(2)對光：用拇指和中指移動旋轉(zhuǎn)器(切忌手持物鏡移動)，使低倍鏡對準鏡臺的通光孔(當(dāng)轉(zhuǎn)動聽到碰叩聲時，說明物鏡光軸已對準鏡筒中心)。打開光圈，上升集光器，并將反光鏡轉(zhuǎn)向光源，以左眼在目鏡上觀察(右眼睜開),同時調(diào)節(jié)反光鏡方向，直到視野內(nèi)的光線均勻明亮為止。

(3)放置玻片標本：取一玻片標本放在鏡臺上，一定使有蓋玻片的一面朝上，切不可放反，用推片器彈簧夾夾住，然后旋轉(zhuǎn)推片器螺旋，將所要觀察的部位調(diào)到通光孔的正中。

(4)調(diào)節(jié)焦距：以左手按逆時針方向轉(zhuǎn)動粗調(diào)節(jié)器，使鏡臺緩慢地上升至物鏡距標本片約5毫米處，應(yīng)注意在上升鏡臺時，切勿在目鏡上觀察。一定要從右側(cè)看著鏡臺上升，以免上升過多，造成鏡頭或標本片的損壞。然后，兩眼同時睜開，用左眼在目鏡上觀察，左手順時針方向緩慢轉(zhuǎn)動粗調(diào)節(jié)器，使鏡臺緩慢下降，直到視野中出現(xiàn)清晰的物象為止。

如果物象不在視野中心，可調(diào)節(jié)推片器將其調(diào)到中心(注意移動玻片的方向與視野物象移動的方向是相反的)。如果視野內(nèi)的亮度不合適，可通過升降集光器的位置或開閉光圈的大小來調(diào)節(jié)，如果在調(diào)節(jié)焦距時，鏡臺下降已超過工作距離(>5.40mm)而未見到物象，說明此次操作失敗，則應(yīng)重新操作，切不可心急而盲目地上升鏡臺。

2.高倍鏡的使用方法

(1)選好目標：一定要先在低倍鏡下把需進一步觀察的部位調(diào)到中心，同時把物象調(diào)節(jié)到最清晰的程度，才能進行高倍鏡的觀察。

(2)轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器，調(diào)換上高倍鏡頭，轉(zhuǎn)換高倍鏡時轉(zhuǎn)動速度要慢，并從側(cè)面進行觀察(防止高倍鏡頭碰撞玻片)，如高倍鏡頭碰到玻片，說明低倍鏡的焦距沒有調(diào)好，應(yīng)重新操作。

(3)調(diào)節(jié)焦距：轉(zhuǎn)換好高倍鏡后，用左眼在目鏡上觀察，此時一般能見到一個不太清楚的物象，可將細調(diào)節(jié)器的螺旋逆時針移動約0.5-1圈，即可獲得清晰的物象(切勿用粗調(diào)節(jié)器!)

如果視野的亮度不合適，可用集光器和光圈加以調(diào)節(jié)，如果需要更換玻片標本時，必須順時針(切勿轉(zhuǎn)錯方向)轉(zhuǎn)動粗調(diào)節(jié)器使鏡臺下降，方可取下玻片標本。

3.油鏡的使用方法

(1)在使用油鏡之前，必須先經(jīng)低、高倍鏡觀察，然后將需進一步放大的部分移到視野的中心。

(2)將集光器上升到最高位置，光圈開到最大。

(3)轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器，使高倍鏡頭離開通光孔，在需觀察部位的玻片上滴加一滴香柏油，然后慢慢轉(zhuǎn)動油鏡，在轉(zhuǎn)換油鏡時，從側(cè)面水平注視鏡頭與玻片的距離，使鏡頭浸入油中而又不以壓破載玻片為宜。

(4)用左眼觀察目鏡，并慢慢轉(zhuǎn)動細調(diào)節(jié)器至物象清晰為止。

如果不出現(xiàn)物象或者目標不理想要重找，在加油區(qū)之外重找時應(yīng)按：低倍→高倍→油鏡程序。在加油區(qū)內(nèi)重找應(yīng)按：低倍→油鏡程序，不得經(jīng)高倍鏡，以免油沾污鏡頭。

(5)油鏡使用完畢，先用擦鏡紙沾少許二甲苯將鏡頭上和標本上的香柏油擦去，然后再用干擦鏡紙擦干凈。

(三)顯微鏡使用的注意事項

1.持鏡時必須是右手握臂、左手托座的姿勢，不可單手提取，以免零件脫落或碰撞到其它地方。

2.輕拿輕放，不可把顯微鏡放置在實驗臺的邊緣，以免碰翻落地。

3.保持顯微鏡的清潔，光學(xué)和照明部分只能用擦鏡紙擦拭，切忌口吹手抹或用布擦，機械部分用布擦拭。

4.水滴、酒精或其它藥品切勿接觸鏡頭和鏡臺，如果沾污應(yīng)立即擦凈。

5.放置玻片標本時要對準通光孔中央，且不能反放玻片，防止壓壞玻片或碰壞物鏡。

6.要養(yǎng)成兩眼同時睜開的習(xí)慣，以左眼觀察視野，右眼用以繪圖。

7.不要隨意取下目鏡，以防止塵土落入物鏡，也不要任意拆卸各種零件，以防損壞。

8.使用完畢后，必須復(fù)原才能放回鏡箱內(nèi)，其步驟是：取下標本片，轉(zhuǎn)動旋轉(zhuǎn)器使鏡頭離開通光孔，下降鏡臺，平放反光鏡，下降集光器(但不要接觸反光鏡)、關(guān)閉光圈，推片器回位，蓋上綢布和外罩，放回實驗臺柜內(nèi)。最后填寫使用登記表。(注：反光鏡通常應(yīng)垂直放，但有時因集光器沒提至應(yīng)有高度，鏡臺下降時會碰壞光圈，所以這里改為平放)